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方案8 酵母提取物的制备实验
新鲜培养的酵母细胞
裂解缓冲液磷酸盐缓冲液
预冷的玻璃珠
1.在微型离心机上离心 3 mm,以收集细胞。2.去上清,用 PBS 重悬细胞,再离心 3 min。3.去上清,估算细胞沉淀的体积,向细胞沉淀中加人 3 倍体积的冰浴裂解缓冲液,悬浮后置于冰上。4.加入等体积的预冷玻璃珠。5.剧烈振荡悬浮液 30s。6.重复步骤5,并在相差显微镜下观察,直到大部分酵母细胞被裂解。7.4°C 条件下在小型离心机中离心悬浮液 5 min,8.小心地倒出上清,并转移到另一管中,置于冰上备用。