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融合蛋白化学降解实验2

2019.3.29
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身
实验材料

融合蛋白

试剂、试剂盒

Tris·ClNaCl盐酸胍羟胺裂解缓冲液SDS

仪器、耗材

离心机水浴锅培养箱

实验步骤

1.  进行预试验以确定最短保温反应时间。将50 μl 1 mg/ml  融合蛋白与50 μl 2×羟胺裂解缓冲液混合在1.5 ml 微量离心管中，45℃温育反应。

 

2.  在0、2、4、8、16和24 h 的反应时刻，分别取10 μl 反应混合物与10 μl 2×SDS样品缓冲液混匀，干冰中冻存直至所有时刻的样本收集完毕。


3.  在沸水浴中将所有样品加热10 min，加样于SDS-聚丙烯酰胺凝胶，电泳分析其裂解程度。

 

4.  确定得到最大程度裂解所需的最短温育反应时间。

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