这种方法在各种交联反应中具有代表性，是最古老和最实用的方法之一。它可以使蛋白质间形成分子间桥梁，也可以令不同蛋白质相连。它更是研究蛋白亚基间作用的有效工具。交联程度取决于反应基团间距离和反应速度。通过控制交联反应时间可研究蛋白质聚合步骤，获得空间结构信息，还可获得许多链长不同的同源结合体，用于研究蛋白亚基间交联与距离的关系。
| 实验材料 | |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | |
| 实验步骤 | 实验所需「试剂」具体见「其他」 混合二甲亚胺溶液，终浓度为 1～12 mg/ml，蛋白质溶于 0.2 mol/L pH 8.5 的三乙醇胺盐酸盐中，浓度为 0.4～5 mg/ml，室温放置 3 h。用中性缓冲液透析。 |
| 注意事项 | |
| 其他 | 试剂： 0.2 mol/L 三乙醇胺盐酸盐，pH 8.5 二甲亚胺（二盐酸盐，Mr＝273.2，用 0.2 mol/L pH 8.5 的三乙醇胺盐酸盐制备溶液，用前现配，如 3 mg/ml） |
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