1. 孵化
选健康受精鸡卵,置入37 ℃温箱孵化;箱内置有水皿,以保持箱内湿度,每日翻动卵一次(180 度); 2. 处理
孵育至9—12 日,取出鸡卵置小烧杯中,令气室端向上,用碘酒和酒精消毒蛋壳;
3. 取胚
用消毒剪剪除气室端蛋壳,小心拨开尿囊膜,用弯玻棒或变镊伸到胚体颈下方,轻轻挑起鸡胚置入平皿中;
4. 清理
去掉胚眼、血块、尿囊膜等物;用BSS 冲洗鸡胚;
5. 粉碎
置入烧杯中用剪刀剪碎胚体后,再用组织研磨器研磨;或放入20—50 ml注射器中(无针头)直接压挤入无菌小烧杯中; 6. 浸出
加入等量的Hanks 液,用吸管轻轻吹打均匀,密封后置37 ℃温箱中30 分钟;
7. 分离
3000 转/分,离心30 分钟,无菌取上清分装入小瓶中,-20 ℃保存;用前再离心一次,取上清使用。
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