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哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物—细胞质组分制备

2019.4.03
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身

实验材料

细胞质提取物

试剂、试剂盒

10× 细胞质提取缓冲液

仪器、耗材

Beckman 50型固定角转子或相当的转子

实验步骤


1) 仔细测量细胞质提取物的体积(见基本方案步骤 7 中的上清)。加入 0.11 倍体积的10×细胞质提取缓冲液,充分混合。


2)100 000 g 离心 1 h。


3)将上清(± 100) 装入透析管中进行透析,直至与S-100 的电导率达到与透析缓冲液一致(100 mmol/L KCL)。


4)从透析管移出上清(±100),25000 g 离心 20 min,以收集沉淀组分。


5)轻轻倒出上清,检测其电导率并测定蛋白质浓度。分装入小管中,液氮中快速冷冻,-80℃保存。

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