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小白鼠
PBS缓冲液丙酮二甲苯乙醇三氯醋酸固绿硫酸铜联苯胺混合液番红过碘酸酒精液Schiff氏酒精液亚硫酸水苏木精Carnoy固定液
光学显微镜解剖器材蜡盘载玻片吸水纸染色缸盖玻片水浴箱
一、方法
1. 以破坏脊髓法处死蟾蜍,将其腹面向上放人蜡盘中,剪开胸腔,打开心包。小心将心脏剪一小口,取心脏血一滴滴在干净载玻片一端,推片,按此法制备二张血涂片,室温晾干。
2. 将涂片作好标记放在70%乙醇中固定5分钟,室温晾干。
3. 放入5%三氯醋酸中60℃30分钟,抽提出核酸。
4. 清水冲洗多次(3分钟以上),以冲去痕迹的三氯醋酸。
5. 滤纸吸干玻片上水分。
6. 一张片放入0.1%碱性固绿(pH8.0~8.5)中染色10~15分钟,另一张片放入0.1%酸性固绿(pH2.0~2.5)染色5~10分钟。
7. 清水冲洗,盖上盖片镜检。
二、结果
经碱性固绿染色片中,胞质、核仁不着色,细胞核大部分被染成绿色,是为碱性蛋白质存在处。经酸性固绿染色片中,因胞质和核仁中有酸性蛋白,被染成绿色。