| 实验方法原理 | 目的 给单层细胞换新鲜培养纂。 应用 用于给快速生长的培养物在传代之间更换培养基，或从一种类型培养基换成另一种培养幕， 训练目标 加强无菌操作技巧．介绍细胞维持的一个基本原理，即在持续培养周期中更换培养基。让实习生观察培养基并明白耗竭培养基的特征．例如细胞密度和（或）pH降低，并观察有没有污染．r解交叉污染的风险。比较冷藏的培养基是否需预温。 监督：向实习生说明耗竭培养革的特征．并示范操作吸取和更换培养幕。 时间：30 min. 背景信息 更换培养篆（见13.6.2节）；监控污染物（见19.4节）；交叉污染（见19.5节）. 示范材料和操作：练习需要至少三瓶半数汇合的连续培养细胞系，如Hela或Vero细胞，并且要标明接种时间和数址。给实习生示范如何从冰箱取培养基，井要强调每个细胞系需特定培养基，而不能混声U或操作。还要示范如何擦拭和整理超净台，牌箱的使用，将培养物放回解箱，用肉眼并在显微镜下观察细胞的状态（有无污染，是否需换液．艘康状态）。示范如何抽取培养基和更换新培养基，这需要真空泵或废液烧杯，如果有必要可以充5%c()：。 安全提示：如果操作人谏细胞．需要使用U级生物安全柜，丢弃的培养基中要加人消毒剂（见7.8.5节和表7.7）。 |
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| 实验步骤 | 练习 |
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