实验方法原理 | 淋巴样细胞通常呈悬浮状生长。常用的培养液为含 10%~15%FBS 的 RPMI1640 各种细胞系间最佳接种密度和平台期细胞密度各不相同。当培养一种新的细胞系时其最佳原则为按 1:2 和 1:4 的比例传代细胞,在 3~4 天时间内进行细胞计数以计算每毫升细胞数。细胞在传代后 24~36 小时细胞数会翻倍。传代细胞密度太低,细胞容易死亡,反映出细胞在达到增长前有较长滞留期。一旦细胞适应实验室的培养条件冉决定备细胞株的最佳接种密度。细胞每毫升接种数量可从 5x104~8x105 不等培养液 PH 下降呈现黄色,表明细胞已达到最大密度需要进行换液或传代培养。 悬浮生长细胞传代一般只需简单稀释操作即可,若需完全更换培养液只需低速离心沉淀,再悬于合适的培养液中即可。 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1、 如果细胞未在转瓶中培养,只需摇晃、刮取或胰蛋白酶处埋(见下文“胰蛋白酶处理分离细胞”)即可将细胞从细胞瓶表面分离下来。 |
注意事项 | 注意无菌操作,操作前用酒精擦拭双手。 |
其他 | 悬浮细胞培养的优点:繁殖速度快、可以培养出龄期均一的细胞集团。 |