多克隆抗体提取实验—

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多克隆抗体提取实验——批量提取法

2019.4.05

致力于为分析测试行业奉献终身

由多种抗原决定簇刺激机体，相应地就产生各种各样的单克隆抗体，这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体。主要用于（1）批量提取多个抗体（2）为进一步验证抗体的作用进行基础操作。

实验方法原理	由多种抗原决定簇刺激机体，相应地就产生各种各样的单克隆抗体，这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体，机体内所产生的抗体就是多克隆抗体；除了抗原决定簇的多样性以外，同样一类抗原决定簇，也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。
实验材料	血清
试剂、试剂盒	DEAE纤维素磷酸盐缓冲液
仪器、耗材	烧杯布氏滤斗滤纸
实验步骤	1. 称取DEAE-纤维素(DE32或DE52)50 g，置于1 000 ml烧杯中，先以蒸馏水漂浮除去细颗粒，再经酸碱处理后，用0.01～0.05 mol/L，pH8.0左右的磷酸盐缓冲液(PB)平衡。 2. 将水分抽干，或用布氏滤斗(内放两层滤纸)过滤，收集湿纤维素，以降低其离子强度。按1 ml血清加湿重5 g DEAE纤维素，经过充分搅拌，置4℃吸附1 h。上清液可再如此处理一次，即获得较纯的IgG。
注意事项	准备前需要配好磷酸盐缓冲液，并测定其PH值。

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