人单核/ 巨噬细胞的表型检测

2019.4.06

致力于为分析测试行业奉献终身

实验步骤	基本方案材料待测单个核细胞（肝素抗凝血或肝素抗凝骨髓）或外周血单个核细胞（单元 8.1)或者单核/巨噬细胞（单元 8. 5 , 推荐采用阴性分选） PBS PBS/肝素：含 0.1% (V/V ) 肝素的 PBS 阻断 IgG，浓度 3 mg/ml (如正常小鼠 IgG， Caltag) 荧光素标记的单克隆抗体（表 6. 3. 2) E M A (Ethidium monoazide) 溶液 A C K 裂解液（新鲜配制，室温保存应< 1 2 h) 7 2 % (m /V ) 甲醛 12m m X 75m m 试管 15m l 锥底塑料离心管（Falcon) 低功率白炽灯（如 40W 白炽灯） Sorvall R T 6000B 离心机和转子 la. 使用肝素抗凝血或抗凝骨髓时：在 15m l 锥底塑料离心管中加入约 IOml 抗凝血或1〜3ml抗凝骨髓， 4℃， 1500g离心 3min。弃血浆，加入 1 〇ml PBS/肝素，盖紧展开

实验步骤

基本方案

待测单个核细胞（肝素抗凝血或肝素抗凝骨髓）或外周血单个核细胞（单元 8.1)或者单核/巨噬细胞（单元 8. 5 , 推荐采用阴性分选）

PBS

PBS/肝素：含 0.1% (V/V ) 肝素的 PBS

阻断 IgG，浓度 3 mg/ml (如正常小鼠 IgG， Caltag)

荧光素标记的单克隆抗体（表 6. 3. 2)

E M A (Ethidium monoazide) 溶液

A C K 裂解液（新鲜配制，室温保存应< 1 2 h)

7 2 % (m /V ) 甲醛

12m m X 75m m 试管

15m l 锥底塑料离心管（Falcon)

低功率白炽灯（如 40W 白炽灯）

Sorvall R T 6000B 离心机和转子

la. 使用肝素抗凝血或抗凝骨髓时：在 15m l 锥底塑料离心管中加入约 IOml 抗凝血或1〜3ml抗凝骨髓， 4℃， 1500g离心 3min。弃血浆，加入 1 〇ml PBS/肝素，盖紧

互联网