实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 重复基本方案1步骤1,按1:10分传到终体积100 ml 的完全DMEM-10/HEPES中。
2. 准备传代细胞时,应将175 cm2培养瓶中的内容物(100 ml)转移到—个850 cm2旋转培养瓶中,另加150 ml 完全DMEM-10/HEPES,盖紧瓶盖,置于转瓶培养装置上于37℃培养1~2天。
3. 用饱蘸70%乙醇无菌海绵擦拭旋转培养瓶的瓶盖和瓶颈,打开瓶盖,加250 ml 完全DMEM-10/HEPES,盖紧瓶盖,再在转瓶装置上培养1~2天。
5. 将培养液倒入无菌的250 ml 的锥形离心管中,室温下250 g 离心20 min,收集上清, 弃沉淀,将上清分装成数管冻存。 展开 |