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大分子物质的水解实验——淀粉水解试验

2019.4.08
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身

实验方法原理

淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖的过程可通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实:淀粉遇碘液会产生蓝色,但细菌水解淀粉的区域,用碘测定不再产生蓝色,表明细菌产生淀粉酶酶。

实验材料

枯草芽孢杆菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)

试剂、试剂盒

固体淀粉培养基革兰氏染色用卢戈氏碘液(Lugol's iodine solution)

仪器、耗材

无菌平皿接种环和接种针

实验步骤

1. 将固体淀粉培养基溶化后冷至 50℃ 左右,无菌操作制成平板。


2. 用记号笔在平板底部划成四部分。


3. 将枯草芽孢杆菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌分别在不同的部分划线接种,在平板的反面分别在四部分写上菌名。


4. 将平板倒置在 37℃ 温室中培养 24 小时。


5. 观察各种细菌的生长情况,将平板打开盖子,滴入少量 Lugol's 碘液于平皿中,轻轻旋转平板,使碘液均匀铺满整个平板。


如菌苔周围出现无色透明圈,说明淀粉已被水解,为阳性,透明圈的大小可初步判断该菌水解淀粉能力的强弱,即产生胞外淀粉酶活力的高低。

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