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1. 制备标本片(1)取干净载玻片1块,用记号笔划分为2个区域,并作好标记;(2)两区各加生理盐水1小滴(3)用灭菌接种环分别挑取少量细菌,在个生理盐水中混匀铺开,形成一薄层菌膜。(4)在室温下自然干燥。(5)将标本通过火焰2~3次固定标本,自然冷却。2. 革兰氏染色(1)初染:在菌膜上滴加结晶紫,以盖满菌膜为度,约1分钟后,用细水流将染液冲洗。(2)酶染:滴加卢戈氏碘液数滴,约1分钟后轻轻冲洗。(3)脱色:滴加95%酒精3~4滴,轻轻晃动玻片数秒钟,倾斜玻片弃去酒精,如此反复数次后,流下的酒精几乎无色或稍呈淡紫色,最后冲洗。(4)复染:滴加稀释复红染液数滴,约1分钟后冲洗。染色完毕后,用吸水纸将玻片吸干,滴加香柏油,镜检。3. 结果判定:白色葡萄球菌被染成紫色,为革兰氏阳性(G+)菌,大肠杆菌被染成红色,为革兰氏阴性(G-)菌,