病毒的鸡胚培养_卵黄囊接种

鸡胚

消毒剂 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精）

检卵灯照明灯卵杯卵盘鸡胚开孔器等

1. 接种步骤与方法

(1) 取 5-8 日龄鸡胚（此时期卵黄囊大，易接种，且有较大的表面积供病原体繁殖），于检卵灯上划出气室和胚胎位置，垂直放置在卵架上，钝端朝上，并用 2. 5%碘酒和 75% 酒精消毒气室端。

(2) 用开孔器在气室中央的卵壳上钻一小孔，勿损伤壳膜，用带有 6 号针头的 1 ml 注射器将样品从小孔处沿胚的纵轴迅速刺入约 3 cm, 注入 0. 2-0. 5 ml 待接种的病毒于卵黄囊内, 随后用胶带或溶化的石蜡封孔。

(3) 置孵化箱内继续孵育 3-8 d，时间长短应根据病毒或立克次体的种类而定，每天翻卵 2 次，弃掉 24 h 内死亡的鸡胚（但东方型和西方型马脑炎可能在接种后 15-24 h 内死亡）。

2. 解剖与收获

(1) 收获时，鸡卵预冷，用 2.5% 的碘酒和 75%酒精消毒气室端的卵壳，用剪子去掉气室上的卵壳，除去壳膜后，用镊子将卵黄囊与绒毛尿囊膜分开。

(2) 取一把灭菌镊子夹出卵黄囊（黄色容易辨认）放在灭菌平皿中，必要时用生理盐水冲去卵黄。也可将全部内容物倾入平皿中，然后剥出卵黄囊。

(3)将不带卵黄的膜放在无菌平皿或烧杯中，以便用于染色检查或进行传代。对某些病毒的

分离则要收集全部胚体。