实验方法原理 | 一、标本采集 支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种,取样后应尽快接种培养。 二、分离培养
混种法:在制备半固体培养基时,培养基加热溶化,温度降至50℃时,添加动物血清、酵母浸液及青霉素后混匀,待冷却至37~40℃时,用无菌滴管吸取标本0.5~1 ml加入培养基中,充分混匀,凝固后置37℃孵育。
三、结果观察 绝大多数支原体为兼性厌氧,少数在含10% CO2和相对湿度80~90%的大气环境中生长良好。支原体生长缓慢,多数于3~4 d长出菌落,少数于1~2 w方长出典型菌落,在平皿固体培养基上生长的菌落呈"油煎蛋"状,边缘不整齐。 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
其他 | 一、附录 糖酵解培养基(肺炎支原体培养基) 基础培养基 70 ml 马(或牛血清) 20 ml 25%酵母浸液 10 ml 0.4%酚红 0.5 ml 1%醋酸铊 2.5 ml 青霉素10000 IU/ml 5.0 ml 调pH 7.8 展开 |