病毒的血清学实验—EB 病毒 VCA-IgA 试验

取冷存的EB 病毒抗原靶细胞涂片置室温中吹干。

用0.01 M，pH7.4 PBS 将即检血清作1：5，1：10 ，1：20 稀释，将各稀释度血清滴加至细胞涂片的小圆穴中，勿使液体外溢。

置于湿盒中在37 ℃温箱作用30 分钟，用同一PBS 浸洗三次，每次5 分钟，末次浸洗后在室温中吹干。

滴加酶标抗体于各小圆穴内，置湿盒中在37 ℃作用60 分钟，同上法浸洗三次。

将新鲜配制的底物溶液滴加在整个涂片上，避光作用10 分钟后，倾去底物溶液，置于无水乙醇中浸3 分钟使脱水。

滴加中性树胶于涂片上，加盖玻片封固，在低倍显微镜下观察结果。

结果判断：
阴性细胞：细胞不着色，或呈浅棕色与背景相同。

阳性细胞：细胞显示不同程度的棕色，胞膜染色较深，细胞表面可见棕色颗粒。

按阳性细胞着色强度和数量，将阳性分为四级：

++++：每个视野内有100 个以上阳性细胞，是深棕色；

+++：每个视野内有数十个阳性细胞，呈棕色；

++：每个视野内有少数阳性细胞，是淡咖啡色；

+：在若干个视野内才见少数阳性细胞，呈淡咖啡色。

此法简便敏感，适于对人群普查鼻咽癌，有助于早期诊断鼻咽癌。

有助于诊断和鉴别诊断鼻咽癌：用VCA-IgA 试验检测鼻咽癌患者，抗体阳性率在90% 以上，抗体滴度1：10 以上或滴度持续上升者，对鼻咽癌有辅助诊断意义。鼻咽癌患者抗体滴度较高，其他肿瘤和正常人血清的抗体阳性率均在6% 以下，且抗体滴度低。

有助于判断疗效和预后：病人疗效显著时，血清中的VCA-IgA 抗体逐渐下降或消失；疗效差，鼻咽癌复发或远处转移时抗体滴度回升。