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小鼠细胞染色体制备及核型分析实验2

2019.4.11
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身

GIEMSA 显带(G显带)

实验材料

分裂中期染色体玻片

试剂、试剂盒

2XSSCNaCl胰蛋白酶 Giemsa溶液磷酸盐缓冲液玻片染色缸

仪器、耗材

亮视野显微镜

实验步骤

1.于室温存放染色体玻片 7~10d。

2.在盛有 60~62°C 的 2XSSC 溶液的广口瓶中孵育玻片 1.5 h,每个广口瓶中盛放玻片不超过 7 张。

3.将玻片转移至 0.9% NaCl 溶液中(室温),用新配制的 NaCl 溶液冲洗玻片并晾干。

4.将玻片在胰蛋白酶/Giemsa 溶液中染色,在将玻片放入广口瓶中之前,用棉球将染色液表面类似金属的薄膜去除,或在取出玻片之前用流动水将薄膜冲掉。

5.将所有玻片移入新配制的磷酸盐缓冲液中。

6.将每一张玻片用磷酸盐缓冲液彻底冲洗 2 次。甩去多余水分,用吹风机吹干玻片。

7.在亮视野显微镜下用 20X 物镜观察显带的染色体,在玻片上滴加镜油,在 loox 油镜下分析染色体。用绿色滤光镜可获得比较好的条带分辨率。用洁净的丙酮去除镜油后,保存玻片。


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