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方法一:1. 受检红细胞:取患者全血脱纤维蛋白(不可用抗凝血,因抗凝血可使阳性变阴性),然后用生理盐水洗涤红细胞3次,配成10%红细胞悬液.2. 将抗人球蛋白血清(coomb’s血清)原液(己稀释4倍保存的血清)及生理盐水稀释成 1:2、1:4、1:8、1:16……等倍数之血清,分别加入凹玻片内各一滴。3. 加入等量患者10%红细胞悬液混匀,置室温,15分钟,观察有无凝集以最高血清稀释倍数之阳性结果报告之。方法二:1. 取3支试管按下表操作:
2. 将2. 3管置37℃1小时,然后3管均用大量生理盐水洗三次,配成10%红细胞悬液。3. 取小试管四支,按表操作:4. 混匀后.置室温3O分钟,观察结果,也可低速离心后观察.5. 结果:若阳性对照凝集,盐水对照及阴性对照均无凝集表示操作及试剂均无问题,然后观察受检管报告之.
1. 抗人球蛋白血清在制好后,需用阳性红血球或致敏的Rh阳性“O”型红血球鉴定,为阳性者方可使用。为此不必每次作试验时作阳性,阴性对照.2. 作试验时,在未知coomb’s血清前即发现红细胞凝集,此多为冷凝集现象,此时应在37℃环境下作试验,以排除冷抗体的存在.3. 洗涤红细胞时,需用多量生理盐水洗三次,以使血清蛋白充分洗净才可排除其抑制阳性结果的因素.4. 自身免疫抗体分为二种,一为温抗体,为IgG在室温及37℃起反应。一为冷抗体,为IgM在0-4℃起反应.因此,必需按照温度环境来作试验.