实验概要
了解常用溶液的配制方法。
实验步骤
1. 1 mol/L Tris-HCl 溶液（pH 8.0）：称取 12.191 g Tris，溶于 80 mL 双蒸水 中，用浓盐酸调 pH 8.0，定容至 100 mL，高压灭菌 15 min，室温保存。
2. 50 mmol/L Tris-HCl 溶液（pH 8.0）：称取 0.606 g Tris，溶于 80 mL 双蒸水中，用浓盐酸调 pH 8.0，定容至 100 mL，高压灭菌 15 min，室温保存。
3. 0.5 mol/L EDTA 溶液（pH 8.0）：称取 18.61 g Na2EDTA·2H2O 溶解于 80 mL 水中，磁力搅拌器上剧烈搅拌，加入 NaOH 固体约 2 g，再滴加 NaOH 溶液调 pH 至 8.0，定容至 100 mL，高压灭菌15 min，室温保存。
4. TE 缓冲液（10 mmol/L Tris，1 mmol/L EDTA，pH 8.0）：于 80 mL 双蒸水中，加入 1 mL 1 mol/L Tris-HCl 溶液，0.2 mL 0.5 mol/L EDTA 溶液，调 pH 至 8.0，加水定容至 100 mL，高压灭菌 15 min，室温保存。
5. 20 mg/mL 蛋白酶 K：称取 0.2 g蛋白酶 K溶于 10 mL 双蒸水中，分装贮存于 -20℃。
6. 5 mol/L NaCl 溶液：称取 29.22 g NaCl，加入 80 mL 双蒸水，搅拌溶解后，定容至 100 mL，高压灭菌 15 min，室温保存。
7. CTAB/NaCl 溶液（0.7 mol/L NaCl，10％CTAB）：称取 4.1 g NaCl，溶于80 mL 双蒸水，磁力搅拌器搅拌的同时，缓慢加入 10 g CTAB，必要时可以 65℃加热促溶，冷却至室温后，加水定容至 100 mL，高压灭菌 15 min，室温保存。
8. 3 mol/L 乙酸钠溶液（pH 5.2）：称取 40.8 g CH3COONa·3H2O，溶于 80 mL双蒸水中，用乙酸调校至 pH 5.2，加水定容至 100 mL，高压灭菌 15 min，室温保存。
9. 苯酚/氯仿/异戊醇（PCI，25∶24∶1）：将重蒸酚、氯仿、异戊醇按体积比 25∶24∶1 混合，上层以 0.1 mmol/L Tris-HCl（pH 8.0）溶液液封，置棕色瓶中 4℃保存。
10. 氯仿/异戊醇：96 mL 氯仿与 4 mL 异戊醇混合，4℃保存。
11. 0.1 mol/L CaCl2 溶液：称取无水 CaCl2（分析纯）2.77 g，加入 200 mL双蒸水充分溶解，定容至 250 mL，高压灭菌，4℃保存。
12. 0.5 mol/L CaCl2 溶液：称取无水 CaCl2（分析纯）13.85 g，加入 200 mL双蒸水充分溶解，定容至 250 mL，高压灭菌，4℃保存。
13. 氨苄青霉素（Amp）储存液（100 mg/mL）：称取氨苄青霉素 1 g，溶于10 mL 水中，过滤除菌，分装贮存于 -20℃。
14. 羧苄青霉素（Car）储存液（100 mg/mL）：称取羧苄青霉素 1 g，溶于 10 mL 水中，过滤除菌，分装贮存于 -20℃。
15. IPTG 储存液（100 mmol/L）：称取 IPTG 0.74 g，溶于 10 mL 水中，过滤除菌，分装贮存于 -20℃。
16. X-gal 贮备液：将 X-gal 溶于二甲基甲酰胺中，配成 20 mg/mL 浓度的溶液，装入玻璃瓶或聚丙烯管中，装溶液的管应以锡铂包裹以防见光使X-gal 受到破坏，应贮存于 -20℃保存。该溶液不必过滤除菌。
17. 10% SDS 溶液：称取 10 g SDS（分析纯）溶于 100 mL 双蒸水中，室温保存。
18. 10% 过硫酸胺（APS）：称取 0.1 g过硫酸胺溶于 1 mL 双蒸水中，现配现用。
19. 50 × TAE电泳缓冲液：
Tris 242 g
EDTA (0.5 mol/L，pH 8.0) 100 mL
冰乙酸 57.1 mL
加双蒸水定容至 1000 mL。
20. SDS-PAGE 蛋白电泳试剂
1). 30% 聚丙烯酰胺溶液：
| 丙烯酰胺 | 30 g |
| 亚甲双丙烯酰胺 | 0.8 g |
溶解后定容至 100 mL，装于棕色瓶，4℃保存。
2). 2 × 加样缓冲液：
| 1 mol/L Tris·HCl (pH 6.8) | 10 mL |
| 甘油 | 20 mL |
| SDS | 4 g |
| 溴酚蓝 | 0.005 g |
| β-巯基乙醇 | 10 mL |
加双蒸水定容至 100 mL，分装后 -20℃保存。
3). 蛋白电泳缓冲液（4 ×）：
| Tris | 1.514 g |
| 甘氨酸 | 7.065 g |
| 10% SDS | 5 mL |
定容至 500 mL。 4). 4 × 分离胶缓冲液：1.5 mol/L Tris-HCl （pH 8.8）
5). 4 × 浓缩胶缓冲液：0.5 mol/L Tris-HCl （pH 6.8）
6). 染色液：
考马斯亮蓝 R-250 | 0.25% （w/v） |
甲醇 | 45%（v/v） |
冰醋酸 | 10%（v/v） |
7). 脱色液I：甲醇∶水∶冰醋酸 = 40∶53∶7
8). 脱色液II：甲醇∶水∶冰醋酸 = 5∶88∶7
21. ELISA 分析试剂
1). 包被缓冲液（0.1 mol/L Na2CO3，0.1 mol/L NaHCO3，pH 9.6）：
Na2CO3 1.06 g
NaHCO3 0.84 g
溶于 80 mL 双蒸水中，调 pH 9.6，定容至 100 mL，高压灭菌室温保存。
2). 磷酸盐缓冲液（10 × PBS）（1.37 mol/L NaCl，0.027 mol/L KCl，0.1 mol/L Na2HPO4，0.02 mol/L KH2PO4，pH 7.4）：
NaCl 40 g
KCl 1 g
Na2HPO4 7.1 g
KH2PO4 1.2 g
溶于 400 mL 水中，加 HCl 调 pH 7.4，定容至 500 mL，高压灭菌，室温保存。
3). 洗涤液 PBST（PBS，0.1% Tween-20）：以PBS∶Tween-20 = 100∶0.1 的体积比于 1 × PBS 中加入 Tween-20，混匀，4℃保存。
4). 封闭液（PBST，5% BSA）：临用前，于 20 mL PBST 中，加入 1 g BSA，充分溶解。
5). 稀释液（PBST，1% BSA）：临用前，于 10 mL PBST 中，加入 0.1 g BSA，充分溶解。
6). 反应终止液：2 mol/L H2SO4。
21. Western blot 试剂
1). 转印缓冲液（10 ×）（1.92 mol/L 甘氨酸，0.25 mol/L Tris，pH 8.3）：
Tris | 15.14 g |
甘氨酸 | 72.07 g |
溶于 400 mL 双蒸水中，调 pH 8.3，定容至 500 mL，4℃保存备用。使用前以双蒸水稀释，如有必要，加入甲醇（体积终浓度为 10% - 20%）。
2). 磷酸盐缓冲液（10 × PBS）（1.37 mol/L NaCl，0.027 mol/L KCl，0.1 mol/L Na2HPO4，0.02 mol/L KH2PO4，pH 7.4）：
NaCl | 40 g |
KCl | 1 g |
Na2HPO4 | 7.1 g |
KH2PO4 | 1.2 g |
溶于 400 mL 双蒸水中，加 HCl 调 pH 7.4，定容至 500 mL，高压灭菌，室温保存。
3). PBST（PBS，0.05% Tween-20）：以 PBS∶Tween-20 = 100∶0.05 的体积比于 1 × PBS 中加入 Tween-20，混匀，4℃保存。
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