五、动物细胞无血清培养技术
动物细胞无血清培养是生物科学领域中的重要研究课题之一。由于无血清培养基可以是完全采用已知分子结构和构型组分的低蛋白或无蛋白培养基。因而它不仅为研究和阐明细胞生长、增殖和分化的调节机制提供了有力的工具，而且为现代生物技术，尤其是细胞工程的应用准备了更好的条件。下面就动物细胞无血清培养基及其应用现状做一概述：
1、动物细胞培养基的发展过程
（1）天然培养基阶段
（2）合成培养基阶段
（3）无血清培养阶段
2、动物细胞培养中血清的作用
（1）提供有利于细胞生长增殖所需的激素、生长因子或提供合成培养基所缺乏的营养物质。
（2）提供可识别金属、激素、维生素和脂质的结合蛋白，并通过与上述物质的结合而起到稳定和调节上述物质的作用。此外结合蛋白还可消除某些毒素和金属对细胞的毒性作用。
（3）提供贴壁细胞固着于适当的附着面所需的贴壁因子和扩展因子。
（4）提供蛋白酶抑制剂，使细胞免受蛋白酶的损伤。
（5）提供 PH 缓冲物质，调节培养基PH。
（6）影响培养系统中的某些物理特性如：剪切力、黏度、渗透压和气体传递速度等。
3、动物细胞培养中血清可能引发的问题：
（1）在一些基础研究中，往往影响实验结果。
（2）血清中含有某些不利于细胞生长的毒性物质或抑制物质，对某些细胞的体外培养有去分化作用。
（3）血清中大量成分复杂的蛋白质给疫苗、细胞因子、单克隆抗体等细胞产品的分离纯化带来很大困难。
4、无血清培养基的组成及其主要补充成分
（1）激素和生长因子
（2）结合蛋白
（3）贴壁因子和扩展因子
（4）低分子量营养因子
5、无血清培养基的优点
（1）可避免血清批次间的质量变动，提高细胞培养和实验结果的重复性。
（2）避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染。
（3）避免血清组分对实验研究的影响。
（4）有利于体外培养细胞的分化。
（5）可提高产品的表达水平并使细胞产品易于纯化。
6、无血清培养基的缺点
主要表现为细胞的适用范围窄，细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响，培养基的保存和应用不如传统的合成培养基方便。
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