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酵母遗传学方法12:酵母菌落PCR方法

2019.4.30
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身

酵母菌落PCR方法

1.在冰上配制反应混合液:

2μl                  10×菌落PCR缓冲液

1.2μl                 25mmol/L MgCl2

0.4μl                 10mmol/L dNTPs

10pmol                引物(每一种引物)

0.2μl                 Taq DNA聚合酶(5U

加水到总体积为20μl

2.用移液器加微量细胞(约0.25μl)到PCR反应混合液中(20μl反应体积)

3.PCR循环参数:

94          4分钟

94          1分钟

55          1分钟

72          2分钟

35个循环

72          10分钟

4.上全部样品进行琼脂糖电泳。


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