牛奶蛋白质测定的优化操作

牛奶蛋白质是牛奶检测的重要指标，作为生命的物质基础之一，蛋白质在催化生命体内各种反应进行、调节代谢、抵御外来物质入侵及控制遗传信息等方面都起着至 关重要的作用。目前，牛奶蛋白质的测定方法主要为国标凯氏定氮法，是有机化合物含氮量测定最常有的方法，是蛋白质测定的经典方法，即使用来进行测定。蛋白质测定仪适用样品广泛，测定结果准确，重现性好，但试剂消耗量大，检测时间长，消化约6～8 h，且消化后样品需定容，定容时容量瓶未摇匀，很容易出现结晶现象，费时费力。

为改善国标检测方法样品称样量大，消化时间长，消化后的样品需定容，操作步骤多的现状，本文对样品的称样量进行了优化，经典凯氏定氮法液体样品的称样量为 1～25 mL,因牛奶样品均匀度较好，故本方法将样品的称样量优化为1.0～1.5g。将样品的称样量从10g减小到1.5g，其他检测条件不变。如果取样具有代表性,改变样品的称样量,对检测结果的影响不大。

样品消化时间主要包括氧化时间，沸腾时间。氧化时间中浓硫酸将有机样品中的碳转化成CO2（这时的溶液为黑色），氢元素转化为H2O，氮元素转化为铵盐。氧化完毕后，溶液变澄清，进入沸腾时间，在沸腾30min后，样品中氮元素全部转化为氨，氮的回收率达到最高。样品消化结束后，消化管中应剩余5-6 mL浓硫酸，如果消化时硫酸消耗完了，会造成氮的损失。在消化期间如果硫酸加入量少，样品会出现结晶情况，因此，硫酸用量应适当，而硫酸用量取决于样品量，本方法中硫酸量的优化参照的为国标方法，国标方法10g样品浓硫酸的用量为20mL，即1g样品硫酸消耗的量为2mL，现将样品的称样量减小为1～1.5g，硫酸的消耗量应不大于3mL，为保证样品消化完后浓硫酸的量有剩余，故将硫酸的量定优化为8.5 mL。