1. 实验原理
血红蛋白中的亚铁血红素与过氧化物酶的结构和功能相似,具有弱过氧化物酶活性,能催化过氧化氢释放新生态氧,氧化色原物而呈蓝色,借以检出微量的血红蛋白。
2. 标本采集
2.1 标本采集前病人准备:以清晨第一次尿为宜,急诊患者可随时留取。
2.2 标本种类:新鲜尿液
2.3 标本要求:采集患者尿液标本时,盛尿液的容器必须清洁干燥,要求留取中段尿。
3. 标本储存:从排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析,应置4℃下冷藏保存,但冷藏时间不得超过6小时。
4. 标本运输:室温运输。
5. 标本拒收标准:细菌,经血,白带,精液,粪便污染标本不能作测定。
6. 试剂
6.1 试剂名称 Combur10 TestR M
6.2 试剂厂家 德国 Roche 诊断试剂公司
6.3 包装规格:100Test/kit
6.4 试剂盒组成:试纸条:100条
6.5 试剂储存条件及有效期:试剂盒贮存于2-30℃条件下,可使用至试剂盒所标示有效期。
7. 仪器设备
7.1 仪器名称:罗氏尿液分析仪
7.2 仪器厂家:Roche
7.3 仪器型号:MiditronR Junior II
7.4 仪器校准程序:在使用过程中,一般是两周校准一次,如超过此期限,仪器会提示“Please Calibrate”(请校准)。通过测定内部参比块,环境温度和光学系统的改变都可被补偿。当条件改变很大时,比如参比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗,仪器将打印出一个错误信息;校准条是有稳定特征的灰白色试条,这些校准条只能使用一次。校准前,应先清洁试纸托盘与运输臂。步骤为:在“
READY—<START>”显示时,按<Calibrate>键,放上校准条。再按<Calibrate>键,校准条被送入机器内,屏幕显示“Calibrating”(正在校准),约一分钟后,标准结果将被打印出。“Calibrating O.K”,表示校准成功。
8. 操作步骤:
8.1 按<START>键,显示“Prepare Strip”,此时试条筒中拿出试条。
8.2 约4秒钟后,显示“Dip Strip 1”,同时绿灯闪烁,将试条浸入尿样中。
8.3 当显示“Insert Strip 1”,把试条放在试条托盘上,此时绿灯亮,若要人工输入颜色,按<Color>键,再按<Set>键,选择相近的颜色,最后按<Enter>键确认,同样也可人工输入浊度。
8.4 约20秒后,显示“Dip Strip 2”,然后重复以上过程。
8.5 每一个测量完成后将自动打印出结果。
9. 结果判断:浅棕色为(—),浅蓝绿色为(+),蓝绿色为(++),蓝色为(+++),深蓝色为(++++)
10. 质量控制:质控尿液的应用:用人工质控尿液进行空内质控,低浓度质控液应为(+),高浓度质控液应为(+++)。
11. 参考范围:阴性
12. 临床意义:正常人尿液中无游离血红蛋白。当体内大量溶血,尤其是血管内溶血,血液中游离血红蛋白可大量增加,当超过1.0-1.35g/L时,即出现血红蛋白尿。此种情况常见于血型不合输血,阵发性睡眠性血红蛋白尿,寒冷性血红蛋白尿,急性溶血性疾病等。还可见于各种病毒感染,链球菌败血症,疟疾,大面积烧伤,体外循环,肾透析,手术后所致的红细胞大量破坏等。
13. 操作性能:快速简便,特异性强,灵敏度高,重复性好。
14. 方法局限性
14.1 试带应妥善保存,注意有效期并避免污染。
14.2 尿液必须新鲜,以免因红细胞破坏,导致干化学试带法与显微镜检查的人为误差。
14.3 各种原因导致尿中出现红细胞,可致假阳性。
14.4 VitC对本实验有抑制作用,可致假阴性。
14.5
路感染时,由于细菌产生过氧化物酶而引起假阳性。某些氧化物如漂白粉也可致假阳性。
14.6 浓缩尿,高蛋白尿可降低试带反应的灵敏度。
14.7 试带上出现绿色斑点提示为完整红细胞所致。
15. 当检验系统(仪器)不能工作时,所采取的补救措施
当检验系统(仪器)不能工作时,可联系仪器厂家,进行紧急修理,如一时不能修好,如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测,如别的实验室无同类仪器,申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。