分析测试百科网

搜索

喜欢作者

微信支付微信支付
×

HLA基因分型方法:PCR-SSCP法

2019.5.20
头像

zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身

PCRSSCP

1)提取DNA

同前RFLP

 

2PCR扩增

同前PCR-RFLP,也可加入1μCi32P-dCTP标记产物。

 

3)非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

1.PCR的扩增产物,加凝胶加样液3μl95℃加热变性2min,冰浴骤冷。同位素掺入的DNA1μl稀释10倍,加样3μl

2.取样品用微量加样器加入非变性聚丙烯酰胺凝胶样品孔中,200V电泳过夜。

 

4)放射自显影

1.未掺入同位素的PCR产物电泳后,取出凝胶床,撬去粘附的玻璃板,将凝胶浸在固定液中15min

2.0.2 AgNO3浸泡10min,用去离子水冲洗。

3.在显色液中显影,直到获得满意效果。将显色好的凝胶转贴到滤纸上,照相分析结果。


生物在线
仪器推荐
文章推荐