叶绿素是植物叶片进行光合作用最重要的物质之一,其素含量是反映植物光合作用能力的重要指标。针对叶绿素含量测定,国内外进行了诸多相关的研究，如用丙酮法提取叶绿素、叶绿素测量仪测量法、用二甲基亚砜直接浸提植物叶片叶绿素等等。每种方法都有其各自的优缺点，但是在实际应用中，现阶段最多的使用叶绿素测量仪进行测定，因为该方法最快捷简单。而且精确度极高。
运用Arnon过滤法所测定的叶绿素含量与其他方法相比差别很大,主要原因可能是Arnon法测定叶绿素含量时需要过滤,过滤过程造成了叶绿素含量的部分损失。Arnon离心法相对于Arnon过滤法效率稍高。浸提法测定叶绿素含量的效率排序依次为: 80%丙酮浸提法<95%乙醇浸提法<三混液浸提法<双混液浸提法。
另外，随着乙醇在混合液中比例的增大,协同作用随之增大,乙醇与丙酮的比例达到1∶1时含量达到最大;随后继续往丙酮中加入乙醇,协同作用开始变小。可见,当乙醇与丙酮的比例达到1∶1时,对罗甸小米核桃叶绿素的浸提最充分。通过不同配比协同作用试验表明,当无水乙醇与无水丙酮比例为1∶1时浸提量最大,所以,单因素试验采用上述溶液为试验浸提溶液。在叶绿素浸提相关文献中,提出了浸提温度、浸提时间和浸提料液比这3个对叶绿素浸提影响最主要的因素。在相同浸提温度和浸提料液比的情况下,当浸提时间从2h增加到5h时,罗甸小米核桃叶绿素含量逐渐升高,并在5 h时达到最大,然后随着浸提时间继续增加,叶绿素含量则不断下降。这说明叶绿素最适浸提时间为5h,不足或超过5h,叶绿素的提取是不充分的。这是由于在浸提开始后,叶绿素有一个由组织向外扩散的过程,因此提取出的叶绿素不断增加。当浸提时间为5 h时,组织中叶绿素向提取溶剂的扩散作用达到平衡,溶液中叶绿素含量达到最高。浸提时间超过5h后,溶液中叶绿素含量开始下降。其可能原因是随着浸提时间的增长,罗甸小米核桃叶绿素暴漏在光线下的时间也就越长,对光的不稳定性造成叶绿素含量不断下降。
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