六、 校准方法
例如日立(Hitachi)系列您必须购买宝灵曼(Boehringer)的试剂及其校准的说明书设置参数，用c.f.a.s.校准血清进行校准，即可获得各项目的校准K值，同时观察一下各项目测定时反应进程图，检查各项目参数设置是否在最佳位置，如不在最佳位置应予以重新设置并测定。此时得到的K值即为准确的校准K值，然后测定待测的10至20份新鲜血清三次取其平均值，应该说此结果是用Hitachi-Boehringer检测系统所获的测定值。然后用此血清值校准其它测定系统。
表 日立7170、BM试剂连续四个月每天进行校正(n=81)K值的变化
| TP | ALB | ALT | AST | Crea | Urea | UA | TG | Chol | Glu | Ca | CK | GGT | |
| Mean | 3017 | 694 | 3023 | 2274 | 14756 | 2673 | 1543 | 1272 | 1449 | 1744 | 592 | 3864 | 2603 |
| SD | 86 | 6.69 | 63 | 49.7 | 1448 | 50.2 | 16.1 | 16.9 | 17.4 | 18.4 | 56.8 | 61.11 | 67.9 |
| CV% | 2.8 | 1.0 | 2.1 | 1.7 | 9.8 | 1.9 | 1.1 | 1.4 | 1.2 | 1.0 | 9.6 | 1.6 | 6.9 |
七、 关于酶活性测定校准问题 www.labdd.com
有的主张不进行校准而采用固定K值，有的作者以为应该进行校准。酶活力计算公式如下：
酶活力（u/l）=△A/min×V×106/(ε×v×1) 令k=V×106/（ε×v；则酶活力（u/l）=△A/min×k www.labdd.com
常用K值有以下几种：
a) 理论K值：根据理论摩尔消光系数（ε）来计算，如NADH为6.22×103
b) 实测K值：由于仪器波长的精密及半宽度不同，而应根据实测ε值来设定K值
c) 厂家给的K值：厂家生产试剂盒说明书上提供的K值（有的厂家提供6.3×103）
d) 校准K值：通过校准物直接校准得到的K值 本文来自检验地带网
在日立7170A全自动生化分析仪上，可以得到几种不同的酶K值，见下表 表 日立7170A全自动生化分析仪上用不同方法得到几种酶的K值
| 指示物 | 波长 | 理论K值 | 实测K值 | 校准K值 | |
| ALT | NADH | 340nm | 2444 | 2642（8.1%） | 3026（23.8%） |
| AST | NADH | 340mm | 2444 | 2642（8.1%） | 2775（13.5%） |
| CK | NADPH | 340mm | 3878 | 3878（8.1%） | 3886（8.3%） |
| GGT | 4NA | 405mm | 1418 | 1539（8.5%） | 1612（13.7%） |
| GGT | 4NB | 405mm | 1475 | 1739（17.9%） | —— |
| ALP | 4NA（PH10） | 405mm | 757 | 825（8.9%） | —— |
注：1校准物为宝灵曼c.f.a.s，试剂也用宝灵曼的配套试剂。
2括号内数字是该K值与理论K值相比的变化率
以上摘自张克坚文章中
* 从上述K值中不难发现实测K值大于理论K值，这说明生化分析仪的测光系统还存在着一定误差，如波长、半宽度及光径等偏差，使仪器达不到理论上的最佳状态；
* 校准K值与实测K值之间也存在一定的差距，即使指示物和仪器相同，其差异可能由试剂及校准品造成的； copyright labdd.com
* 作者认为最好使用校准K值，但必须由两个先决条件：1必须使用配套的试剂；2必须使用配套的高质量的校准品，但校准K值应有其溯源性。
关于酶活标准品，欧洲标准局（BCR）和美国国家标准技术研究院（NIST）均发表了人血清基质的酶活性标准物，相信不久将会有公认的标准（校准）品问世。
首页
