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微生物培养基的原理、制作和现象:牛肉(或牛心)消化汤

2019.8.31
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

成分
  绞碎牛肉(或牛心)   1000g
  15%氢氧化钠溶液    27mL
  胰蛋白酶       40mL
  三氯甲烷       1mL
  氯化钠        10g
  蒸馏水        2000mL


制法
  1 称取碎牛肉,加蒸馏水,隔水加热到80℃,维持15min。
  2 加氢氧化钠溶液,对pH试纸呈弱碱性,冷至40℃。
  3 加胰蛋白酶、氯仿,在36±1℃放置4~5h,每小时摇动一二次。
  4 4h后,吸取上层液5mL于试管中,加5%硫酸铜溶液0.1mL、4%氢氧化钠溶液5mL,混合之。若呈红色,则不须再消化,可由温箱取出。
  5 加入15%乙酸溶液45mL,对pH试纸呈酸性。
  6 煮沸15min,使胰蛋白酶破坏,冷后,放冰箱内一夜。
  7 次日吸取上层清液,加氯化钠10g,并加水补足原量,煮沸。
  8 校正pH7.4~7.6(加15%氢氧化钠溶液约10mL),加热,用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min。


注:①此培养基可作为琼脂培养基的基础,不需加蛋白胨。
  ②胰蛋白酶之配制:称取去脂绞碎的猪胰500g,加入乙醇500mL、蒸馏水1500mL,混合之,装人玻塞瓶内。每日摇匀三次。3d后,用绒布过滤挤出其汁,加盐酸至0.05%,放冰箱内保存备用。


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