基本方案
实验材料 | 鲑精DNA |
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试剂、试剂盒 | TE 酚 氯仿 乙酸钠 |
仪器、耗材 | 离心机 摇床 超声仪 |
实验步骤 |
1. 将TE缓冲液加入装有干燥鲑精DNA的烧杯中,至鲑精DNA浓度为5~10 mg/ml。用10 ml 吸管反复吹打后,用搅拌棒于4℃搅拌过夜,最终获得一种均匀粘稠液体。
5. 分别加入1/10体积的3 mol/l 乙酸钠和2.5体积冰冷的无水乙醇,充分混匀后,于约12 000 g 离心15 min。
6. 弃上清,用70%乙醇洗涤沉淀并干燥,DNA以无菌的TE缓冲液重溶至浓度为5~ 10 mg/ml。
7. 于100℃将DNA变性20 min,然后迅速置于冰浴。用微量离心管分装DNA,于-20℃保存,需要时再取出解冻,用于转化实验之前要重新煮沸。
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