1．过氧化氢(H2O2)玻片法（过氧化氢酶试验法）
大多数活细胞包括白细胞都含有过氧化氢酶，能分解过氧化氢而产生氧。但正常乳中的白细胞少，过氧化氢酶很少；乳房炎时，白细胞增多，故过氧化氢酶也增多，放出的氧也多。
(1)试剂。取双氧水(30% H2O2)，按1：(2.33～4)的比例加入中性蒸馏水，配成6%～9%过氧化氢试剂待用。
(2)方法。将载玻片置于白色衬垫物上，滴被检乳3滴，再加过氧化氢试剂1滴，混合均匀，静置2min后观察。
(3)判定标准见下表。
被检乳 | 反应 | 判定符号 |
阴性乳 | 液面中心无气泡，或有小如针尖的气泡聚集 | - |
可疑乳 | 液面中心有少量大如粟粒的气泡聚集 | ± |
感染乳 | 液面中心布满或有大量大如粟粒的气泡聚集 | + |
2．氢氧化钠凝乳检验法
正常乳加药后无变化，有乳房炎的乳汁，混合后变黏稠或变为絮片。但不适用于初乳及末期乳的检验。
(1)试剂。4%苛性钠溶液。
(2)方法。将载玻片置于黑色衬垫物上，先加被检乳5滴，再加试剂2滴，用细玻棒或火柴杆迅速将其扩展成直径2. 5cm的圆形，并继续搅20s，观察。如乳样事先经冷藏保存，则只加试剂一滴。
(3)判定标准，见下表。
被检乳 | 乳汁反应 | 判定符号 | 推算细胞总数 |
阴性 | 无变化，无凝乳 | - | 50以下 |
可疑 | 出现细小凝乳块 | ± | 50-100 |
弱阳性 | 有较大凝乳块，乳汁略微透明 | + | 100-200 |
阳性 | 乳凝块大，搅拌混合时有丝状凝结物形成，全乳略成水样透明 | ++ | 200以上 |
强阳性 | 大凝块，有时全部形成凝块，完全透明 | +++ | 500- 600 |
3．溴麝香草酚蓝(B．T．B)检验法
是一种较简单常用的方法，测定乳汁的pH变化。健康牛乳呈弱酸性，pH为6．0～6.5；乳房炎乳为碱性，其pH升高的程度依炎症的轻重而不同。
(1)试剂。47. 4%酒精500mL加B．T. B1g，再加5%苛性钠溶液1.3～1.5mL，三者混合均匀，试剂呈微绿色。如偏酸时，滴碳酸氢钠液；如偏碱时，滴加盐酸，校正成中性。
(2)方法。
试管法：首先在10mL试管中加入B．T．B试剂1mL，再加入被检乳5mL，混合均匀后静置1min观察。或者首先在10mL试管中加入被检乳5mL，然后用2mL吸管吸取B．T．B试剂1mL，沿试管壁缓慢滴入被检乳中，观察被检乳与试剂接触的变化。
玻片法：将载玻片置于白色衬垫物上，滴被检乳1滴，再加B．T．B试剂一滴，混合观察。
(3)判定标准，见下表。
被检乳 | 颜色反应 | pH | 判定符号 |
阴性乳 | 黄绿色 | 6-6.5 | - |
可疑乳 | 绿色 | 6.6 | ± |
感染乳 | 蓝绿或青绿 | 6.6以上 | + |
4．烷基硫酸盐(C．M．T)检验法
是通过测定DNA的量来估测乳中白细胞数的方法。试剂是一种阳离子表面活性剂（如烷基丙烯硫酸钠）和一种指示剂（溴甲酚紫），但对初乳期和末期的牛乳不适用。
(1)试剂。苛性钠159，烷基硫酸钠30～50g（烷基硫酸钾、烷基烯丙基硫酸钠、烷基丙烯硫酸钾亦可代用），溴甲酚紫(B.C．P)0.1g，蒸馏水1000mL，混合为溶液。
(2)方法。先将被检乳2mL，置于深1.5cm、直径5cm的乳白色塑料皿中，再加入试剂2mL，缓慢做同心圆搅拌l5s，观察结果。
(3)判定标准，见下表。
被检乳 | 乳汁反应 | 判定符号 |
阴性 | 液状无变化 | - |
可疑 | 有微量沉淀物，但不久即消失 | ± |
弱阳性 | 部分形成凝胶沉淀物 | + |
阳性 | 全部形成凝胶物，回转搅动向心集中，停止搅动则呈凹凸状覆着皿底 | ++ |
强阳性 | 全部形成凝胶物，回转搅动向心集中，停止搅动则恢复原状，覆着皿底 | +++ |
酸性乳 | 由于乳酸分解，液体呈黄色 | 酸性乳 |
碱性乳 | 呈深黄色，为接近干乳期，感染乳房炎，泌乳量降低的现象 | 碱性乳 |
四、注意事项
(1)奶样应保持新鲜，如采集时间已久，即使冷藏保存也可能变质而影响检验结果，特别是B．T．B检验法，对奶样的要求更加严格，乳汁pH发生变化，判断的结果则不准确。最好现场操作。
(2)配制试剂的各药品均应为化学纯的，所用的各种器皿（试管、吸管、塑料平皿等）用前均须用中性蒸馏水冲洗干净，否则会影响准确性。
(3)为了增加学生操作机会及熟悉各种不同奶样（正常的、感染的）的反应现象，可根据实习时间，尽可能收集足够数量和质量的奶样，以便进行对照检验。
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