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由于不同分子的荧光寿命不同，可在激发与检测之间延缓一段时间，使具有不同荧光寿命的物质得以分别检测，即时间分辨荧光分析。采用带时间延迟设备的脉冲光源和带有门控时间电路的检测器件，可以在固定延迟时间后和门控宽度内得到时间分辨荧光光谱。选择合适的延迟时间，可以把待测组分的荧光和其他组分或杂质的荧光以及仪器的噪声分开不受干扰。采用激光光源可以获得皮秒(ps)级的脉冲宽度，可用于测定大多数荧光物质的寿命，非常有助于生物大分子和基团作用的研究。该技术与荧光免疫分析结合形成了时间分辨荧光免疫分析法。
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