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悬浮细胞克隆的分离

2019.10.20
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184****5725

致力于为分析测试行业奉献终身

           

实验方法原理 用加样枪或 Pasteur 吸管吸取集落，移至培养瓶或多孔板的培养孔中。
仪器、耗材

生长培养基 多孔板 培养瓶 解剖显微镜 移液器 粗头笔 黄色枪头

实验步骤

1. 用倒置显微镜观察培养皿中的细胞，用毡制粗头笔或 Nikon 标记笔标记出集落。

2. 24 孔板的每一孔中加 1 ml 培养基。

3. 解剖显微镜（20~50× 放大）下挑取集落

(a)每一个细胞集落用一个枪头（加样枪上的黄色枪头）。

(b)将移液器调至 100 μl。

(c)先用枪头吸大约 50 μl 的培养基，将该枪头对准要分离的集落，在集落内轻轻吸取剩余的 50 μl。

4. 将吸取物移至 24 孔板，用培养基冲洗集落，如果培养基中含美希索，集落就会固定、黏附，然后生长；如果培养基含有琼脂，则需用吸管在培养孔内上下吹吸集落几次，分散琼脂。细胞克隆也可以直接移至竖直放置的 25 cm2 的塑料培养瓶中。

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