实验方法原理 | 各种细胞操作,包括传代、冻存和原代组织的分离,均能导致细胞死亡。为了确定群体细胞中的存活细胞数,可采用台盼蓝染料排斥实验(Phillips 1973)。正常的健康细胞能排斥染料,但细胞膜完整性丧失后台盼蓝可弥散入细胞内。染料排斥实验是一种粗糙的估计细胞活力的方法,无法区别 10%~20% 的活力差异。除此之外,排斥染料的细胞有可能不贴壁或不能较长时问生存或繁殖。 |
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实验步骤 |
1) 胰蛋白酶处理细胞(见上文“胰蛋白酶处理分离细胞”),无菌状态下取 0.5 ml 细胞用 PBS 稀释至每毫升 2X105~4X105。 展开 |