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甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)使用说明书

2019.10.24
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

    甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法) 用于细胞核染色、肥大细胞染色,规格为100ml,属细胞染色液类,有效期12个月.
 

  【信息说明
 

  产品名称:甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)
 

  供应商:远慕染色液厂家
 

  规格:100ml
 

  分类:细胞染色
 

  储存条件:室温,避光,12个月
 

  用途:细胞核染色、肥大细胞染色
 

  注意事项:硼酸盐溶液配制,甲苯胺蓝中的阳离子与组织细胞的酸性物质结合而被染色。染色结果为:细胞核呈蓝色,而肥大细胞胞质内含有肝素等异色性物质呈异染性紫红色。
 

  【染色原理
 

  1、甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性,更利于组织细胞的着色;甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团,从而成色原显色。
 

  2、甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
 

  3、甲苯胺蓝还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类;帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色。
 

  4、肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质,遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色,临床上经常用于肥大细胞染色。
 

  【注意事项
 

  1、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色,浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。
 

  2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
 

  3、请严格按照甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)说明书上的要求进行规范化操作。
 

  4、如果本品没有使用完,请遵循染色液相关保存方法进行完善保存。
 

  【操作步骤
 

  甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)属细胞染色液类产品,其他操作步骤主要有以下四点进行:
 

  肥大细胞染色
 

  脱蜡至蒸馏水。
 

  根据切片厚度和组织的不同,浸染于甲苯胺蓝染色液。
 

  蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。
 

  4、冰乙酸分化,直到细胞核和颗粒清晰可见。
 

  快速和无水乙醇脱水。
 

  6、 二甲苯透明,封固。
 

  染色结果:肥大细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。
 

  B、软骨染色
 

  1、 石蜡切片入二甲苯。
 

  2、 系列乙醇各。
 

  3、 自来水洗。
 

  4、 入Toluidine Blue O Stain,浸染。
 

  5、 自来水洗,滤纸吸干水分。
 

  6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
 

  7、 逐级乙醇脱水。
 

  8、 二甲苯透明,中性树胶封固。
 

  染色结果:软骨、成骨细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。
 

  C、细胞涂片染色
 

  1、用乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释即可。
 

  2、细胞涂片后,立即放入乙醇中固定,取出放在纸巾上。
 

  3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染,加盖玻片让染料渗透到细胞中。
 

  4、将玻片竖起,稍加压力,使多余染料被纸巾吸去。
 

  5、无需干燥,直接镜检。
 

  染色结果:细胞核、淋巴细胞呈深蓝色;核仁呈紫红色;红细胞呈橘红;细胞质、单核细胞呈淡蓝色。
 

  D、原位杂交染色
 

  1、 用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度,凭经验一般稀释比例大于1:100。
 

  2、 玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。
 

  3、 在蒸馏水或去离子水浸泡数次。
 

  4、 按需求进行压片固定。
 


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