海胆和沙币
海星
海鞘
软体动物
实验材料 | 海胆和沙币 |
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试剂、试剂盒 | KCl 溶液 3-氨基-1 2 4-三唑 |
仪器、耗材 | 巴斯德吸管 Nytex 滤器 |
实验步骤 | 一、海胆和沙币体腔内注射 0.5 mol/L 的 KCl 1. 制备 0.5 mol/L 的 KCl 溶液。 2. 用海水冲洗一下动物以去掉颗粒物质。 3. 用一个 23~26 号的针头向动物的口缘空腔内注射多达 500 μl 或 100 μl KCl。 4. 用巴斯德吸管收集“干”精子,并储存于置于冰上的小塑料管中。‘ 5. 将雌性动物在一杯海水中翻过来收集卵子。 6. 用 Nytex 滤器洗卵子,以去掉颗粒,并使卵子吸附到滤膜上。 7. 通过将水吸走或小心倒掉,再加入洁净的海水将卵子洗几遍。 二、海胆的电刺激 1. 将海胆反口面向上放在纸巾上。 2. 将两个电极一边一个放在接近生殖管的贝壳部位,配子就会从生殖孔中释放出来。 3. 如果需要,在生殖管周围的几个部位通以电流。 4. 开始收集卵子和精子,并受精。 三、海胆和沙币卵的受精 1. 制备稀释的精子悬液。 2. 向洗过的卵中加入精子。 四、受精膜的去除 1. 获取卵子。 2. 将卵子重悬于含有 1mmol/L 3-氨基-1,2,4-三唑的海水中。 3. 受精。 4. 当受精膜出现后,将卵子倒入直径比卵子小几微米的 Nytex 网中。 |