1.从已平衡至室温的密封袋中取出实验所需板条,未用的板条和干燥剂请放回铝箔袋内压 实自封条,密封口袋,放回4℃。
2.空白孔加规范品和标本稀释液,其他相应孔中加标本或不同浓度规范品(100ul/孔),用封板胶纸封住反响孔,36℃孵箱孵育90分钟。
3.提早20分钟预备生物素化抗体工作液。
4.洗板5次。
5.空白孔加生物素化抗体稀释液,其他孔参加生物素化抗体工作液(100ul/孔)。用新封板胶纸封住反响孔,36℃孵箱孵育60分钟。
6.提早20分钟预备酶结合物工作液。避光室温(22-25 ) ℃ 放置。
7.洗板5次。
8.空白孔加酶结合物稀释液,其他孔参加酶结合物工作液(100ul/孔)。用新封板胶纸封住反响孔,36℃孵箱,避光孵育30分钟。
9.翻开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
10.洗板5次。
11.参加显色底物(TMB)100ul/孔,避光36℃孵箱,避光孵育15分钟。
12.参加终止液100ul/孔, 混匀后即刻丈量OD450值(3分钟内)。在仪器保存读数成果并打印一份纸质成果。
13.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回电冰箱保存至有效期完毕。