分析测试百科网

搜索

喜欢作者

微信支付微信支付
×

保存标本ELISA试剂盒知多少

2019.11.28
头像

王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

ELISA试剂盒标本保存,在ELISA试剂盒试验中是非常重要的,常有ELISA操作员反映在标本保存时呈现溶血、凝聚不全、受细菌污染等现象发作,我公司技术员特针对相关常见问题做出总结,下面我们就来看看今天的内容:搞定ELISA试剂盒办法我有好方法!

一、标本保存不当

在冰箱中保存过久的标本,血清中IgG可聚组成多聚体、AFP可构成二聚体,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、乃至构成假阳性;标本放置时刻过长(如一天以上),有时抗原或抗体免疫活性削弱,亦可呈现假阴性。为战胜上述搅扰,ELISA测定的血清标本宜为新鲜收集;如不能当即测定,5天内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白质部分浓缩,散布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不行激烈振动。

二、标本溶血

因为各种人为原因引起的标本溶血,均可因红细胞损坏溶解时释放出很多具有过氧化物酶活性的血红蛋白,在以辣根过氧化物酶为标记的ELISA测定中,会导致非特异性显色,ELISA试剂盒搅扰测定成果。为战胜上述搅扰效果,标本收集时有必要留意防止溶血。

三、标本凝聚不全

在没有促凝剂和抗凝剂存在的状况下,正常血液收集后1/2~2h开端凝结,18~24h彻底凝结。临床查验工作中,有时为了争取时刻快速检测,常在血液还未开端凝结时即强行离心别离血清,此刻的血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中能够构成肉眼可见的纤维蛋白块,易构成假阳性成果;这类状况于次日复查时因血凝已彻底,血清中不再有纤维蛋白原存在,故复查成果变为阴性。为防止上述搅扰效果,处理的办法最好是血液标本收集后有必要使其充分凝结后再别离血清,或标本收集时用带别离胶的采血管或于采血管中参加恰当的促凝剂。

四、标本管中增加物质的影响

抗凝剂、酶抑制剂及快速别离血清的别离胶等均对ELISA测定有必定搅扰效果。

五、标本受细菌污染

因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶,因而,被细菌污染的标本同溶血标本相同,亦可发生非特异性显色而搅扰测定成果。

做好了ELISA试剂盒要素和操作要素之后,保证检测成果的准确性就简单的多了。

互联网
文章推荐