分析测试百科网

搜索

喜欢作者

微信支付微信支付
×

ELISA试剂盒实验步骤详解

2019.11.29
头像

王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

做任何实验,都不行能完全没有差错,我们能做的就是尽最大的努力削减实验差错。在ELISA试剂盒实验操作中,差错分有系统差错、偶然差错、过错差错,而一个小小的差错主意可以影响到实验,那么怎样才干缩小实验差错呢?除了需求仔细之外,还有一些需求要点留意的当地。

1:留意试剂盒保存期,过保存期的试剂不能运用。

2:评价试剂的实用性,试剂的稳定与否,对率的高低到头重要。在试剂启用前,应进行阴、阳对照及样品重复对比实验,断定试剂符合要求后方可运用。

3:严厉把握显色时刻,显色时刻过短,参加停止液反应停止后,底物结合物的量过少,易呈现假阴性。超过显色要求时刻后显色,应判为假阳性,这可能与试剂本身有关。加显色剂后当即显色,不行报阳性,这可能是本底显色的成果。

4:加样要、快速。如果加样不,酶生成物的量不能断定,直接影响显色成果。显色的深浅及A值的测定与参加显色剂和停止液的量有关,所以加样应稳重。要求在必定时刻内加样结束的实验,如果加样缓慢,便呈现差错,并且试剂长时刻暴露在外,特别室温过高时,保存期会缩短乃至失效。

5:检验技师应具有从事实验室操作的基本素质和实践经验。能娴熟操作实验仪器、器械,具有必定总结和剖析问题的才干,对实验中呈现的意外情况能及时妥善解决。

6:运用校对过的微量移液器,扫除自然差错。移液器与否对定量检测尤为重要。

7:仔细阅读说明书,严厉依照说明书要求进行规范化操作。不同批号的试剂不行混用。值得改善的当地,重复实验断定建立后才干改善。

8:洗刷完全,如若洗板不完全,酶结合物本底显色会呈现假阳性。洗刷液要新鲜,现用现配,陈腐的洗刷液会呈现本底增高现象,也可能呈现假阳性。

9:严控反应时刻,反应时刻过长,酶失活;反应时刻过短,酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充沛结合,生成物结构松懈不结实,容易洗掉,都可能造成假阴性。

 


互联网
文章推荐