目前国际上最流行的免疫检测拟合方式是“四参数逻辑拟合"，用这种拟合方式往往能够比较的反映浓度和吸光度的曲线关系，从而进一步比较准确的获得样品中待测物质的浓度值。ELISA试剂盒但我们做很少有时候能够有这么理想的情况，浓度和相应od值往往是"s"型的曲线关系，这时就不能用直线拟合的方式了，而对拟合方法进行选择就是必要的了。枢纽在于你的尺度曲线做到了s形的哪一部门，你想检测的样品浓度在曲线的哪一部门。

当然，假如用于定量，仍是在中间一段较好。但建模型是一回事，而用它来定量是另一回事。这些方法固然没有一种方法可以通用，但也都可以用。但并不是说它就是的。事实上不仅是Elisa，其它良多生物学反应都是s形曲线，也都可以用logistic曲线拟合。在ELISA试剂盒中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。加标本一般用微量加样器，按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴，以发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀的血清，ELISA试剂盒可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液，再在其加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物用液时可用定量多道加液器，使加液过程迅速完成。