最常用于检测抗原的方法是非竞争性的双抗体夹心法，其次是竞争法。但竞争法在具体实验中有些困难，特别是检测微生物的抗原，因为需要标记抗原，这对于某些抗原是很难做到的，大鼠ELISA试剂盒甚至是不可能的。另外在竞争法中，酶标记的抗原与标本直接混合在一起，许多标本中含有酶抑制剂或蛋白A样物质，可影响ELISA的结果。

检测抗体种类常用的方法是检测抗体种类的捕获法，这个方法常用于检测特异性IgG、IgA和IgM。这个方法的*步是捕获所需要检测的一个种类的抗体，接下来是检测捕获的抗体是否是特异性抗原的抗体。间接大鼠ELISA试剂盒在检测IgG时比较简单，但不适用于检测其他种类的抗体，因为血清中如果有特异IgG存在将与IgM或IgA等竞争结合抗原。

一、抗原的纯度达到多少？    

如果对本底要求不是很高对化，不纯对抗原对包被影响不大，如果可以避免交叉反应的化，包被物中的一些杂质有时还可以起一定的封闭作用（但于科研），你就先用抗原包被（采用不同稀释度），用间接法检测。

二、在加液的时候，如果不用多道移液器，对结果有影响吗？    

技术分析：对于熟练的技术人员来说，可能影响不会很大，如果不是很熟练，结果就很难说了。也正是因为如此，进口大鼠ELISA试剂盒的说明书都要求用多道移液器或自动加样器加样。