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扫描电子显微镜看到的图像是怎么样的?

2019.12.12
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guoliming

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扫描电子显微镜看到的图像是黑灰白,就像黑白电视机,通过衬度对比突显出样品结构,所谓彩色都是软件加上去的伪彩色。这是由电子显微镜的工作原理决定的。

扫描电子显微镜常用两种是透射电子显微镜和扫描电子显微镜。其镜筒和样品室都是密闭的真空环境,所谓光源是电子束。电子束通过电磁透镜发生汇聚,透射电镜是电子束穿透样品,接受透射电子信号产生图像;扫描电镜是电子束达到样品表面反射出的二次电子,背散射电子等信号成像。透射电镜成像对样品有厚度要求,否则电子无法穿透,样品最厚不能超过200nm,一般生物样品70-80nm,材料学样品40-50nm,甚至更薄20nm左右。

生物样品可以通过超薄切片机用钻石刀进行切割,材料样品依据不同材料性质选择制样手段,高分子材料一般用徕卡超薄切片机进行超薄切片,无机固体材料用徕卡离子减薄仪进行离子减薄。扫描电镜对样品尺寸没有太大限制,但是也需要制样,如果看表面结构,不导电的话,一般需要表面镀膜处理,可以通过离子溅射喷镀金或铂金薄膜,或通过蒸镀沉积铂碳膜,徕卡提供专用镀膜仪,可以精确控制镀膜厚度。如果要用扫描电镜看样品内部结构,就需要采用工具解剖样品,由于扫描电镜放大倍数很高,一般可达数万倍甚至五六十万倍,有效的无应力切割或研磨抛光方式才能真正获得无假象的图像。徕卡有一款三离子束研磨仪,可以实现无应力切割或离子束抛光,可以获得高质量的样品内部结构信息。


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