(一)保留时间变化
1.柱温变化 柱恒温,必要时需配置恒温箱;
2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱;
3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液;
4.柱污染 每天冲洗柱;
5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相;
6.柱快达到寿命 采用保护柱。
(二)保留时间缩短
1.流速增加 检查泵,重新设定流速;
2.样品超载 降低样品量;
3.键合相流失 流动相PH值保持在3~7.5检查柱的方向;
4.流动相组成变化 防止流动相蒸发或沉淀;
5.温度增加 柱恒温。
(三)保留时间延长
1.流速下降 管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡;
2.硅胶柱上活性点变化 用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱;
3.键合相流失 同前(二)3;
4.流动相组成变化 同前(二)4;
5.温度降低 同前(二)5。
(四)出现肩峰或分叉
1.样品体积过大 用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%;
2.样品溶剂过强 采用较弱的样品溶剂;
3.柱塌陷或形成短路通道 更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件;
4.柱内烧结不锈钢失效 更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品;
5.进样器损坏 更换进样器转子。