液相色谱仪色谱柱在使用前，最好进行柱性能测试，并将结果保存起来，作为以后评价柱性能变化的参考。但要注意，柱性能可能由于所使用的样品、流动相和柱温等条件的差异而有所不同。

一、样品的前处理：

1、最近好使用流动相溶解样品。

2、使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。

3、使用0.45μm滤膜过滤除去微粒杂质（固体不溶物、无机盐和细菌）。

二、流动相的配制：

液相色谱是利用样品组分在柱填料与流动相之间的质量交换而达到分离的，因此，要求流动相具备以下特点：

1、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中或长时间保留在柱中。

2、流动相与样品不发生化学反应。

3、流动相粘度要尽量小，以便得到好的分离效果，降低柱压，延长泵使用寿命。可通过提高温度降低流动相粘度。

4、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UVD，zui好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。

5、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。

6、在流动相配制好后，一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，又可防止流动相中的微量氧与样品发生作用。

三、流动相流速的选择：

液相色谱中，柱效是色谱柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱，要追求zui优柱效，zui好使用zui优流速。

1、最近优流速的选择：

（1）内径4mm色谱柱，流速一般为0.8mL/min。

（2）内径4.6mm色谱柱，流速一般为1mL/min。

（3）内径10mm制备柱，流速一般为3mL/min。

当选用最优流速时，分析时间可能会延长，可采用改变流动相洗脱强度的方法以缩短分析时间。如使用反相柱时，可适当增加甲醇或乙腈的含量。

2、流动相使用注意事项：

使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命，提高柱性能。

（1）含水流动相zui好在实验前配制，尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相时放置不要超过12h。zui好加入叠氮化钠，防止细菌生长。

（2）流动相要使用0.45μm滤膜过滤，除去微粒杂质。

（3）使用HPLC级溶剂配制流动相。