为了解决胆红素试剂的稳定性,尽量排除基质效应对测定的影响,本科采用了双试剂方法测定。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 试剂组成 Trace试剂。总胆红素试剂A:盐酸0.1mol/L,对氨基苯磺酶0.050mol/L,表面活性剂1%;试剂B:亚硝酸0.072mol/L;直接胆红素试剂A:盐酸0.165mol/L,对氨基苯磺酶0.029mol/L;试剂B:亚硝酸0.072mol/L。
1.2 试剂配制
1.2.1 TBil单试剂法(TB 1 ) 试剂A:试剂B=50:1,使用前混合。
1.2.2 TBil双试剂法(TB 2 ) 第一试剂R 1 为A;第二试剂R 2 为试剂B与双蒸水50:1配制使用。
1.2.3 DBil单试剂法(DB 1 ) 试剂A:试剂B=100:1,使用前混合。
1.2.4 DBil双试剂(DB 2 ) 第一试剂R 1 为A:第二试剂R 2 为试剂B与双蒸水100:1配制使用。
1.3 仪器 美国康宁560生化分析仪。
1.4 测定主要参数 见表1。
2 结果
2.1 方法比较 本方法与改良J-G法比较,改良J-G法(见全国临床检验操作规程第二版)为手工操作,设为Y,n=40,TB浓度2.76~456.3μmol/L,Y TB =0.995X TB +1.680,r=0.999,DB浓度0.89~402.8μmol/L,Y DB =1.011X DB +1.612,r=0.9984。
2.2
重复性试验 总胆红素批内n=10,ˉx 低 =34.3±0.46,CV%=1.34%;ˉx 高
=376.7±2.54,CV%=1.37%;直接胆红素批内n=10,ˉx 低 =11.9±0.14,CV%=1.42%,ˉx 高
=169.3±2.54,CV%=1.50%;总胆红素批间n=10(天),ˉx 低 =34.8±1.12,CV%=3.22%;ˉx
高=376.7±5.12,CV%=3.34%,直接胆红素批间n=10(天),ˉx 低 =22.5±0.79,CV%=3.51%;ˉx 高
=167.9±5.23,CV%=3.62%。
2.3 回收试验 取已知定值血清加入一定量标准品,测定其回收率,总胆红素回收率96.8%~102.7%,平均为99.5%;直接胆红素回收率为96.6%~103.2%,平均为98.8%。
表1 康宁560主要参数
注:ˇλ1为主波长,λ2为副波长,双试剂第一时间点为样品空白读数