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高效液相色谱中色谱柱在作样前和作样后如何平衡?

2020.1.04
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

一般来说,液相色谱柱通常被称为反相色谱柱反相色谱柱,如C18、C8、苯基柱等。

这些柱储存在有机相中,如甲醇和乙腈,因此在储存时,大部分的柱用甲醇或乙腈密封。然而,大多数反向流动相为缓冲盐溶液,在纯有机相中容易结晶,因此在中间会有10%的甲醇水(或乙腈水)作为缓冲液。

因此,每次使用前,先将10%甲醇水冲洗30 min,流速为1.0ml/min,然后上流动相平衡,可注入30 min左右的基线流平。

每次使用后:10%甲醇水冲洗30min,流动相缓冲盐冲洗干净,再用甲醇冲洗30min储存。

如果使用的柱的内径为250mm*4.6mm,如果使用的是150mm或100mm的短柱,则柱体积可以根据柱的长度和柱的内径计算,其中30min是柱体积的10倍。πr^2*柱长。

如果液相色谱柱为正相,则不存在中间过渡,因为正相色谱的流动相中没有无机盐。流动相可以直接平衡。使用后直接用规定的标准溶液密封。


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