高效液相色谱中是否可用保留值定性？

在气体或液相色谱的操作中，当仪器的操作条件保持不变时，任何物质的峰值总是存在于色谱图中的固定位置，即一定的保留值它还包括：停滞时间、保留时间、校正保留时间、保留体积等。

液相色谱保留值的方法主要用于直接控制已知标准的方法。当未知峰的保留值（t‘r或v‘r）与已知标准峰的保留值完全相同时，未知峰可能与已知标准峰的物质相同，特别是当改变色谱柱或洗脱液的组成时，如果未知峰的保留值仍与已知标准品的保留值完全相同，则可以将未知峰与标准品基本鉴别为同一物质。

在与保留值数据进行比较和定性分析中，特别重要的是注意，在液相色谱中使用的色谱柱的再现性不是理想的，即使具有相同数量的色谱柱的色谱柱的重现性不一致，这允许分析保留的值数据的使用受到限制因此，现有的保留值数据只能作为定性分析的参考可以基于这些数据和样品的知识来选择已知的标准，然后将这些已知标准与在相同色谱条件下的unknwn直接比较。

保留值简单的定性方法是将已知的标准物质加入样品中。如果能增加某一峰，改变色谱柱或洗脱液的组成，则该峰所代表的组分基本上可以被鉴定为与已知对照品相同的物质。

一些HPLC仪器目前配备了一个三维光谱检测器，例如二极管阵列检测器，它除了比较保留时间外，还可以比较两个峰的三维形状，还可以比较保留时间。例如，在使用二极管阵列检测器时，除了比较未知组分和已知参考物质的保留时间外，还可以比较两者的紫外光谱。如果保留时间相同，两者的紫外光谱完全相同，那么我们基本上可以认识到它们是同一种物质；如果保留时间相同，但两者的紫外光谱相差很大，那么它们就不是同一种物质。利用3d-map进行对照品比较，大大提高了保留值比较定性方法的准确性。美国Bio-Rad公司的血液药物分析仪（Rememeli）依靠对三维图谱合成数据的分析，以识别unknown药物。