本文对高效液相色谱法测定饲料中三聚氰胺的色谱分离条件进行了优化方法线性好，回收率高，精密度好。饲料中的杂质峰对三聚氰胺峰的干扰较小。该方法简便易行，准确度和精密度均符合要求。可用于复合饲料中三聚氰胺的检测。
1、仪器
高效液相色谱紫外检测器和色谱工作站
氮吹仪;
振荡器、 旋涡振荡器及均质器;
电子分析天平的灵敏度为0.0001g。
冷冻离心机;
0.45μm 针筒式微孔滤膜过滤器,
超声波清洗器,
混合阳离子交换柱，60mg/3mL固相萃取仪pH 计。
2、试剂
三聚氰胺对照品 ：含量为 99.0％）,
乙腈、甲醇与庚烷磺酸钠为色谱纯,
氨、乙酸醋酸铅均为分析纯实验用水为超纯水。
3、溶液配制
1%冰醋酸溶液：取5 ml冰醋酸装在500 ml容量瓶中，用水稀释，固定在水垢上5%氨水甲醇溶液：取5ml氨水于100ml容量瓶中加甲醇定容至刻度。将醋酸铅溶液22g/L：11g醋酸铅溶于300ml水中，定容至500ml。20%甲醇溶液：取甲醇200ml，加水800ml，混匀，流动相：2.0 2g庚磺酸钠，取1L瓶，溶于水，稀释成规模化。pH值调整为用醋酸。溶液为850ml，加入150ml乙腈。将溶液混合、过滤并脱气。
三聚氰胺标准储备液：在50 ml药瓶中准确提取三聚氰胺对比剂0.0505g，超声波溶解于甲醇溶液中，固定体积，即1000μ/mL三聚氰胺标准储备液。
三聚氰胺标准工作液：取适量三聚氰胺标准储备液，用甲醇溶液稀释成5个标准系列，浓度分别为1.0ug/ml、5.0ug/ml、10.0ug/ml、25.0ug/ml、50.0ug/ml。
4、色谱条件
色谱柱：C8 柱 （ 4.6mm×250mm , 5μm ） ;
流速 1.0 mL/min ;
进样量: 20μL ;
柱温: 30℃ ;
检测波长：240nm。
5、试验方法
样品处理方法：进样用均质机粉碎，称取5.0g样品（精确至0.01g）于150ml塞住的锥形瓶中，精密加入50ml 1%醋酸溶液，加入2.0ml醋酸铅溶液，摇匀，超声提取20分钟。在静置2min时，上液在50ml塞离心管中约30ml，离心5min10000r/min。
用3ml甲醇和3ml水预先活化steta-x-c柱。固相萃取柱用3ml水和3ml甲醇洗涤。萃取后上清液用3ml氨水甲醇溶液洗涤，50℃氮气干燥，准确加入2.0ml甲醇溶液，旋转1分钟，通过0.45um滤膜，用高效液相色谱法测定。
首页
