高效液相色谱法检测葡萄籽提取物中的原花青素

以葡萄籽提取物为原料，以AB8大孔树脂为原料吸附纯化，不同浓度乙醇梯度洗脱，真空干燥洗脱液，采用高效液相色谱仪对分级产物进行定性、定量分析。

1. 液相色谱条件

流动相：A为2%冰醋酸；B为乙腈：水：冰醋酸80:19.6:0.4

检测波长：280 nm；

流速：1.0 mL/min；

色谱柱：反相 C18 柱；

2. 对照品测定

准确称取约50mg原花青素标准物，放入10mL棕色容量瓶中，加入50%乙醇，将超声波溶液溶解至室温，使体积恒定，摇匀，用5mg/mL原氰配制对照液。采用高效液相色谱法（hplc）对0.45微米滤纸和10微米针剂后的样品进行分析。

3.样品制备

将预处理后的ab-8大孔吸附树脂加载到色谱柱上.以合适的流速将已知浓度的原花青素样品溶液加入柱内，分批收集出水，用香草醛-硫酸法测定浓度。当出水浓度达到样品溶液浓度的1/10时，停止样品，用4倍于柱床体积（bv）的去离子水以2 bv/h的流速冲洗柱，冲洗后，用体积分数分别为20%、30%、40%、50%和60%的乙醇对原花青素进行梯度洗脱，洗脱流速为2bv/h，各为4bv/h，分批收集出水，真空干燥得到不同浓度的产品。乙醇洗脱条件。

4.样品检测及含量测定

用不同浓度的乙醇洗脱(20％，30％，40％，50％，60％)精确称量约50mg成品，加入10ml棕色容量瓶中，加入50％乙醇，超声溶解并冷却至室温，定容，振荡，通过0.45进行高效液相色谱分析。通过原花青素的标准光谱测定不同浓度的乙醇洗脱液中的低聚物和低聚物的存在。

5.含量测定

根据原花青素的标准光谱和高效液相色谱分析结果，测定了不同浓度乙醇洗脱液中opc的含量。