液相色谱高效液相色谱柱在使用一段时间后会出现一些常见的故障，如果不能很好地判断和解决，就会影响色谱柱的使用效果，从而影响样品的分析结果。
高效液相色谱柱常见的几种故障判断及排除方法：
1。在高效液相色谱(HPLC)的应用过程中，柱压问题是一个值得关注的问题。柱压的稳定性与色谱的峰形、柱效、分离效果和保留时间密切相关。
1.1压力过高：
这是使用高性能液相的常见的问题，它指的是压力的突然增加，这通常是流动路径中堵塞的原因。此时，我们应该分段进行检查。
1首先断开真空泵的入口，此时，PEEK管充满液体，使PEEK管低于溶剂瓶，以查看液体是否自由滴落，如果液体不滴落或缓慢滴落，则溶剂过滤头被堵塞。
处理方法：
用30%硝酸浸泡半小时，用超纯水冲洗。如果液体自由滴下，溶剂过滤头正常，再检查；
2.打开净化阀，使流动相不会通过柱。如果压力没有明显下降，过滤器的白头就会被堵塞。
处理方法：
去除滤过的白头，用10%异丙醇超声半小时。如果压力降至100PSI（6.7Bar）以下，过滤白头正常，再检查；
3拆下柱子的出口端，如果压力不下降，柱子就被堵住了。
处理方法：
在缓冲盐堵塞的情况下，用95%的水冲洗，直到压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞，则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。
如果按照上述方法冲洗压力不会长期下降，则考虑将柱的进出口连接到仪器上，并用流动相冲洗柱。此时，如果柱压仍未下降，只需改变柱口筛板，但一旦操作 不太好，很容易导致柱效下降，所以，尽量少用。
1.2压力过低
压力过低的现象一般是由于系统泄漏
处理方法：
寻找每个界面，特别是色谱柱两端的界面，并拧紧泄漏。当然，另一个原因是泵进入空气中，但此时往往表现为压力不稳定，突然间高低不一，更严重的是会导致泵无法吸收液体。
处理方法：
打开清洗阀，并以3-5mL/min的流速冲洗。如果未使用，请使用专用注射器将气泡从净化阀中抽出，并施加外力。
2.漂移问题主要包括基线漂移和保留时间漂移。
2.1基线漂移
一般来说，当机器启动时，基线很容易漂移，如果使用缓冲溶液或缓冲盐，则需要大约半小时的平衡时间，而低波长(220 Nm)的平衡时间相对较长，但是，如果在实验过程中发现基线漂移，则应考虑以下原因：
①紫外灯能量不足。
解决方法：
更换新的紫外灯；
②柱温波动。
解决方法：
控制柱和流动相的温度，检查是否有打开的窗户或冷气机面对柱温箱。
(3)循环池受污染或含气。
解决方法：
用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流槽(好是破坏柱)。如有必要，使用1 N硝酸(而不是盐酸)。
④流动相污染、变质或由低品质溶剂配成。
解决方法：
检查流动相的组成，并使用高质量的化学试剂和HPLC溶剂。
样品中的强保留质量(高K值)用馒头峰洗脱，从而显示基线的逐步升高。
解决方法：
如有必要，在注射之间使用防护柱。在分析过程中，常用强溶剂对色谱柱进行洗涤。
探测器没有设置在大吸收波长。
解决方法：
将波长调整到大吸收波长；
(7)流动相pH值调节不好。
解决方法：
加适量的酸或碱调至佳pH值；
2.2保留时间漂移
保留时间再现是液相性能质量的重要标志。同样，保留时间和保留时间之间的差异不应超过15s，超过半分钟可视为保留时间漂移，因此无法定性。您应该考虑以 下原因：
①温控不当。
解决方法：
调节柱温，检查是否有开着的窗户或空调机对着保温箱。
②流动相比例变化。
解决方法：
检查四元泵的比例阀是否有故障。
③色谱柱没有平衡。
解决方法：
允许有足够的时间在每次运行之前平衡列。
④流速变化。
解决方法：
重新设定流速。
⑤泵中有气泡。
解决方法：
从泵中除去气泡。
2.3峰型异常问题
峰型问题是液相的主要问题，在做液相过程中，我们就是要变换不同的条件来改善不好的峰型，对于各种各样的异常峰，要区别对待，从主要问题出发，一个一个加以解决。
①所有峰均为宽峰。
解决方法：
系统未达到平衡；
溶解样品的溶剂极性比流动相差很多；
色谱柱尺寸及类型选择不正确；
色谱柱或保护柱被污染或柱效降低；
温度变化造成的影响。
②所出峰比预想的小。
解决方法：
样品黏度过大；进样品故障或进样体积误差；检测器设置不正确，定量环体积不正确；检测池污染；检测器灯出现问题。
③色谱图中未出峰。
解决方法：
系统未进样或样品分解；
泵未输液或流动相使用不正确；
检测器设置不正确；
针对以上情况成因作相应调整即可。。。
下一个或几个峰是负峰。
解决方法：
流动相的吸收背景较高；进样过程中空气进入空气；样品组分的吸收低于流动相。
⑤所有峰均为负峰。
解决方法：
信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒；
光学装置尚未达到平衡。
⑥出现双峰或肩峰。
解决方法：
进样量过大；样品浓度过高；
保护柱或色谱柱柱头堵塞；
保护拄或色谱柱污染或失效；
柱塌陷或形成短通道。
⑦前伸峰。
解决方法：
进样量或样品浓度高；
溶解样品的溶剂较流动。
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