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提取的基因组DNA不能顺利的进行后继实验的解决方法

2020.2.26
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

得到的基因组在进行常规下游实验如PCR、酶切、分子杂交等生物学实验时如不能顺利进行,主要原因为DNA 样品不纯,含有蛋白、有机溶剂和盐类等杂质影响内切酶或DNA 聚合酶的活性:

1 ) 样品过多导致细胞裂解不充分:

裂解液不能有效与样品混合,导致裂解不彻底,残留大量蛋白、多糖、脂类等杂质,为后继的上吸附柱分离纯化造成影响。

2 ) DNA 洗脱前,有大量乙醇残留:

有机溶剂乙醇可严重的抑制内切酶、DNA聚合酶的活性,而在DNA过柱洗涤过程中均使用含有乙醇的去蛋白液和漂洗液,因此在洗脱 DNA前,一定要充分去除残留的乙醇,再加洗脱液。


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