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引物片段退火后不能连接到载体上是什么问题？

2020.3.21
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

连接反应需要引物的5’磷酸基团。如果需要将合成的引物退火直接连接相应的载体上，引物需要磷酸化。磷酸化的产物如果还不能连接载体上，需要检查载体的酶切效果，需要改善引物退火的条件。

SiRNA分子具有特殊的对称结构，退火的难度较大，退火时需要提高退火温度。

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